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视频课题：福建省高中生物优质课比赛视频_1.2基因工程的基本操作程序 （一）
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福建省高中生物优质课比赛视频_1.2基因工程的基本操作程序 （一）
1.2基因工程的基本操作程序 （一）
教学目的：l．简述基因工程原理及基本操作程序
重点难点：
重点：基因工程操作程序的四个步骤
难点：（1）从基因文库中获取目的基因
（2）利用PCR技术扩增目的基因
教学手段：多媒体辅助教学
新课引入：
简单介绍基因的结构包括原核基因和真核基因的结构；
阅读教材相关内容，看图说明基因操作的四个步骤：
一、提取目的基因—将需要的基因从供体中提取出来
1.目的基因：编码蛋白质的结构基因
2.获取目的基因的方法：
（1）从基因文库中获取目的基因
①基因文库
概念：将含有某种生物不同基因的许多DNA片段，导入受体菌的群体中，各个受体菌分别含这种生物的不同基因，称为基因文库。
种类：基因组文库：含一种生物的所有基因。（常用方法：鸟枪法）
部分基因文库（cDNA文库）：含一种生物的部分基因。（常用方法：反转录法）
比较基因组文库与CDNA文库的区别和联系
（2）利用PCR技术扩增目的基因
①PCR概念：一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术
②条件：已知目的基因的核苷酸序列（示PCR动画过程）
③过程：目的基因受热形成单链DNA（94℃）
单链DNA与引物结合（55℃）
在DNA聚合酶作用下延伸成DNA（72℃）
④方式指数扩增：2n
⑤原理：DNA复制
思考：PCR技术与生物体内DNA复制相比，有何异同？
（3）人工合成法
即已知蛋白质氨基酸序列—推出mRNA序列—目的基因序列
思考：人工合成法合成的目的基因具有何特点？
二、基因表达载体的构建
1.基因表达载体的构建过程
同种限制酶分别切割载体和目的基因，再用DNA连接酶把两者连接。
目的基因与运载体结合（以质粒为运载体）
2.构建目的基因表达载体的目的：
使目的基因在受体细胞中稳定存在；可以遗传给下一代；使目的基因能够表达和发挥作用。
3.表达载体的组成：
目的基因
基因表达 启动子：位于基因首端，RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动转录基因
载体的组成 终止子：位于基因尾端，使转录在所需要的地方停下来
标记基因：鉴别受体细胞中是否含有目的基因
思考：启动子是否就是起始密码子？终止子是否就是终止密码子？
板书设计：
教学反思：
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